交配時，雄蛇只用兩個半陰莖中的一個。雄蛇把其中一個半陰莖，由內向外，經過泄殖腔孔旁側翻出，精子沿著半陰莖表面的淺溝，注入雌蛇的泄殖腔里。有些種類的蛇，精子在雌蛇體內的存活期長達3～4年，仍有受精能力。

在繁殖季節內，一條雄蛇可先后和幾條雌蛇交配，但雌蛇只交配一次。所以，養蛇場里常常讓一條雄蛇配上幾條雌蛇，進行繁殖，例如養殖銀環蛇的蛇園，每十條雌蛇配兩三條雄蛇就夠了、交配后，精子在雌蛇的輸卵管內能夠長期生存。

例如，在杭州浙江醫科大學蛇園，有一對蝮蛇只交配一次，分開后，雌蛇連續生了3年小蛇，第一年產仔7條，第二年產仔10條，第三年產仔14條。有的蛇，交配一次，精子可在雌體內生存5年之久。蝮蛇是卵胎生的蛇，但大多數的蛇是卵生的。蛇一般都是一年生一窩。

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蛇的種類很多，交配季節和時間也不完全相同。大多數蛇類是在每年的5月份交配，但有的蛇如銀環蛇等少數幾種蛇卻是在每年的10月份交配。所以蛇交配的具體情況還是要看蛇的種類，一定要了解清楚，避免不必要的麻煩出現。